L'agar di destrosio di patata (PDA) è un buon mezzo semisolido di uso generale utilizzato per la coltura di funghi. Viene spesso usato per isolare, crescere e mantenere specie che formano funghi. È possibile acquistare piastre di Petri o provette già pronte contenenti PDA oppure è possibile realizzare rapidamente PDA utilizzando una premiscela commerciale. Tuttavia, non è difficile creare una versione semplice ed efficace da zero a basso costo.
credito: Zedcor interamente posseduto / PhotoObjects.net / Getty ImagesPreparare l'Estratto Di Patate
Passo 1
Mettere le patate in una casseruola con circa 1,2 litri di acqua di rubinetto e far bollire su una stufa per 1 ora.
Passo 2
Rimuovi la casseruola dal fuoco e lascia raffreddare il liquido fino a quando può essere maneggiato comodamente (circa 10 minuti).
Passaggio 3
Versare l'estratto di patate liquide attraverso un colino o una garza e raccoglierlo in un altro contenitore.
Preparare il mezzo
Passo 1
Aggiungi destrosio e agar a 1 litro di acqua di estratto di patata.
Passo 2
Testare il pH della soluzione con carta per test del pH o un pHmetro.
Passaggio 3
Se il pH è superiore a 6,5, regolarlo verso il basso aggiungendo una goccia di soluzione di acido cloridrico alla volta e ripetere il test.
Passaggio 4
Se il pH è inferiore a 6, aggiustarlo aggiungendo una goccia di soluzione di idrossido di sodio alla volta e ripetere il test.
Sterilizzazione
Passo 1
Miscelare accuratamente il terreno e dividerlo in lotti più piccoli di 250 mL versati nei quattro matracci da 500 mL (Nota: ogni pallone non deve essere più della metà pieno per evitare che bolle).
Passo 2
Coprire ogni pallone con un pezzo di foglio di alluminio leggermente piegato, in modo che il foglio non cada, ma non si sigilli.
Passaggio 3
Metti le boccette in una pentola a pressione.
Passaggio 4
Azionare la pentola a pressione secondo le istruzioni del produttore per sterilizzare il PDA a 121 ° C (250 ° F) ad una pressione di 103.421 Pascal (15 PSI) per 15 minuti.
Passaggio 5
Spegnere la pentola a pressione e lasciarla tornare alla pressione atmosferica, quindi rimuovere le boccette e lasciarle raffreddare fino a quando non possono essere maneggiate.
Versare il mezzo
Passo 1
Allineare le piastre di Petri sterili su una superficie piana.
Passo 2
Una volta che le boccette si sono raffreddate fino alla temperatura di manipolazione, ma prima che il mezzo inizi a solidificarsi, afferrare un pallone con una mano e rimuovere e mettere da parte il coperchio di alluminio con l'altra mano.
Passaggio 3
Per ogni capsula di Petri, sollevare il coperchio con una mano, riempire rapidamente a metà con liquido PDA e sostituire il coperchio.
Passaggio 4
Ripetere il passaggio 3 sopra fino a riempire tutte le capsule di Petri.
Passaggio 5
Se è rimasto del PDA, recuperare liberamente il pallone con il coperchio originale, lasciarlo raffreddare e solidificare, stringere il coperchio e conservare in frigorifero.
